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SphI内切酶图片
产品货号:
M20240
中文名称:
SphI内切酶
英文名称:
Sph I Endonuclease
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

Sph I是经过基因工程重组的快速限制性内切酶,适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。


本制品含通用的Buffer和Color Buffer,其中Color Buffer含红色和黄色示踪染料,酶切产物可直接用于凝胶电泳。Color Buffer的红色染料与2500bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近;黄色染料与10bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。




Sph I


组分规格
Sph I50μL
10×Buffer1mL
10×Color Buffer1mL

保存:-20℃,有效期2年。


  • Sph I的同裂酶有:Pae I。
  • 不同DNA中的Sph I酶切位点数量:
    λDNAΦX174pBR322pUC57pUC18/19SV40M13mp18/19Adeno2
    60111218
  • DNA甲基化修饰对Sph I酶切影响:
    DamDcmCpGEcoKIEcoBI
    无影响无影响无影响无影响剪切受影响



  • 若进行双酶切或多酶切,每种快速内切酶的用量为1μL,且所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。可根据需要适当扩大反应体系。
  • 若同时使用的几种快速内切酶的最适反应温度不同,则应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,并在其最适反应温度下进行酶切。
  • 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
  • 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。



  • DNA快速酶切流程
    • 在冰上按下表配制反应体系:
      成分质粒DNAPCR产物基因组DNA
      ddH2O15μL16μL30μL
      10×Buffer2μL3μL5μL
      底物DNA2μL(≤1μg)10μL(~0.2μg)10μL(5μg)
      Sph I1μL1μL5μL
      总体积20μL30μL50μL
      • 若底物DNA为PCR产物,建议使用经纯化的PCR产物。若使用未经纯化的PCR产物,可将10×Buffer或10×Color Buffer减少至2μL。
    • 轻轻吸打或轻弹管壁混匀反应液。切勿涡旋。瞬时离心收集挂壁液滴。
    • 对于质粒DNA,37℃孵育15min;对于PCR产物,37℃孵育15~30min;对于基因组DNA,37℃孵育30~60min。
    • 可选步骤:80℃孵育20min可使酶失活,停止反应。
    • 若使用10×Color Buffer,酶切产物可以直接进行上样电泳。
  • 适用于质粒DNA的扩大反应体系
    DNA1μg2μg3μg4μg5μg
    Sph I1μL2μL3μL4μL5μL
    10×Buffer2μL2μL3μL4μL5μL
    总体积20μL20μL30μL40μL50μL
    • 若总反应体系大于20μL,可适当增加孵育时间,尽量使用水浴、金属浴或沙浴。

相关搜索:SphI内切酶SphI限制酶限制性内切酶Pae ISph I Endonuclease
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